Thí Luyện Sinh Tử xoay quanh truyền thuyết về Thử thách Ngũ độc trong thế giới võ thuật, một trò chơi sinh tử mà chỉ một người có thể sống sót để giành phần thưởng là một ngàn lượng vàng. Lin Yun, một người du hành bí ẩn, hợp tác với Qiao Yu, Feng Yiyang và những người khác để vượt qua các thử thách và kẻ thù nguy hiểm. Trên hành trình, họ phải đối mặt với những mặt tối của con người như tham lam, tức giận, ám ảnh, kiêu ngạo và nghi ngờ. Giữa sự hỗn loạn, Lin Yun và Qiao Yu lập kế hoạch thông minh để đối đầu với các thế lực ẩn sau trò chơi, nhằm tìm kiếm công lý và giải pháp.